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Visual-PCR 支原體檢測試劑盒說明書

更新時間：2019-12-18 點擊次數(shù)：1517

gmbiosciences Visual-PCR 支原體檢測試劑盒說明書

Visual-PCR 支原體檢測試劑盒

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支原體一直被認(rèn)為是細(xì)胞培養(yǎng)的常見污染。在支原體檢測方法中，PCR是高度靈敏，特異和便捷的方法¹。但是，到目前為止，所有可用的PCR試劑盒都是一個漫長而費力的過程。

Visual-PCR ^TM 支原體檢測試劑盒是一種直觀，直觀，簡便的檢測支原體的方法。它基于我們專有的Visual-PCR技術(shù)。該技術(shù)使PCR擴增可以改變顏色。*，肉眼在可見光下可以對PCR進行監(jiān)控。不需要DNA提取，將粗樣品直接用作PCR模板。PCR后凝膠電泳是不必要的。得益于Visual-PCR技術(shù)，用于細(xì)胞培養(yǎng)的常規(guī)支原體篩查變得像移液樣品一樣簡單。

支原體事實：
15％-80％的細(xì)胞培養(yǎng)物被
污染...

如何減少
污染

肌瘤檢測的挑戰(zhàn)

請點擊此處了解詳情

描述：

Visual-PCR ^TM 技術(shù)是PCR 的重大突破。PCR反應(yīng)本身產(chǎn)生明顯的顏色變化，肉眼很容易察覺。PCR結(jié)果*無需任何機器或設(shè)備即可直觀地讀出。PCR之前的DNA提取/樣品制備和PCR后的凝膠電泳不再需要。選擇覆蓋所有6種常見支原體物種的優(yōu)化引物組。將PCR敏感的變色成分添加到PCR混合物中。PCR后，陽性反應(yīng)顯示為藍色，表明存在支原體DNA。PCR陰性顯示紫色。肉眼很容易識別出急劇的顏色變化（圖1,2,3,4）。無需DNA提取和預(yù)處理（離心，煮沸），就可以將各種粗略樣品（細(xì)胞培養(yǎng)物，冷凍細(xì)胞系，培養(yǎng)基，血清，咽喉拭子等）直接用作PCR模板。視覺PCR^TM 試劑盒代表了簡單的基于PCR的支原體檢測方法。

好處：

革命性的技術(shù)：肉眼可視地監(jiān)控PCR
顏色急劇變化，并且可以通過肉眼輕松讀取（圖1,2,3,4）
動手時間少于5分鐘
2小時內(nèi)得到樣品
粗樣品直接用作PCR模板（圖3,4）
無需DNA提取，無需樣品預(yù)處理（例如旋轉(zhuǎn)，煮沸）
沒有PCR后凝膠電泳
無PCR后移液
適用于各種粗樣品：貼壁或非貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，冷凍細(xì)胞系，DMEM，RPMI-1640，血清，冷凍溶液，青霉素/鏈霉素溶液，非必需氨基酸，1x PBS，咽喉拭子等。（圖3、4）
展示的靈敏度：10次拷貝/反應(yīng)（圖2）
檢測多種支原體種類/菌株（請單擊此處以獲取列表）

協(xié)議：

1.將組分A，B和C混合到完整的PCR雞尾酒中，每個反應(yīng)等分24ul。
2.添加1ul粗樣品并進行PCR。目視檢查PCR試管的顏色。

圖。1。Visual-PCR支原體檢測試劑盒的典型顏色變化。
有或沒有模板的PCR反應(yīng)均顯示不同的顏色。正是藍色，負(fù)是紫色。

圖2。Visual-PCR支原體檢測試劑盒敏感。
將合成的奧拉支原體16s RNA基因的不同拷貝摻入PCR混合物中，然后進行PCR。

圖3。粗樣品直接用作PCR模板。
將培養(yǎng)試劑（DMEM，F(xiàn)BS，RPMI-1640）摻入支原體（1000拷貝/ ul），然后直接用作PCR模板。然后進行PCR。

圖4。對來自可疑實驗室的各種粗樣品進行支原體測試。
通過Visual-PCR支原體檢測試劑盒對來自可疑實驗室的各種樣品進行了支原體污染檢測。粗樣品無需DNA提取或樣品預(yù)處理即可直接用作PCR模板。

套件內(nèi)容：

成分A，B和C：準(zhǔn)備完整的PCR雞尾酒
成分D：陽性對照DNA模板（Orale支原體的合成16s RNA基因）

儲存方式：

產(chǎn)品在冰上運輸，到達時存放在-20°C。
完整的PCR雞尾酒配制后應(yīng)保存在4°C下。穩(wěn)定1個月。

何時檢測支原體：

示例應(yīng)用程序：

•無法復(fù)制已發(fā)布的數(shù)據(jù)
• 數(shù)據(jù)不一致，偏倚和歪斜
•實驗室中有人咳嗽或打噴嚏
•培養(yǎng)新的細(xì)胞系
•從外部來源獲得新的細(xì)胞系
•3個月未測試支原體
•共用了通風(fēng)櫥或CO2恒溫箱其他
•細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)
•細(xì)胞相關(guān)材料/產(chǎn)品的生產(chǎn)

•研究細(xì)胞培養(yǎng)物，冷凍細(xì)胞系
•細(xì)胞培養(yǎng)基和補充品
•血清
•生物反應(yīng)器中的高滴度CHO培養(yǎng)物
• 生物反應(yīng)器中的高滴度NS0培養(yǎng)物
•細(xì)胞培養(yǎng)疫苗生產(chǎn)收獲物
•細(xì)胞培養(yǎng)抗體生產(chǎn)收獲物
•生物測定細(xì)胞系
•干細(xì)胞培養(yǎng)物
•淋巴細(xì)胞增殖培養(yǎng)
•細(xì)胞和組織治療培養(yǎng)
•咽拭子
•表面濕巾

技術(shù)參考：

1. Young L，Sung J，Stacey G，Masters JR。細(xì)胞培養(yǎng)中支原體的檢測。Nat Protoc。2010; 5（5）：929-34。

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