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貨號：P7050L
產(chǎn)品描述：
DNA聚合酶I是一種嗜溫性DNA聚合酶，除3'→5'和5'→3'核酸外切酶活性外，還具有5'-3'DNA合成。DNA合成和5'→3'核酸酶特征的組合使DNA合成期間的缺口翻譯成為可能。
規(guī)格： | 5,000 U |
濃度： | 10,000 U/ml |
純度（SDS-PAGE） | > 99％ |
活性： | 6,850 U/mg |
SS核酸外切酶 | 實用 |
DS核酸外切酶 | 實用 |
DS內(nèi)切核酸酶 | 200 U = no conversion |
大腸桿菌 DNA污染 | 200 U <10 copies |
蛋白質(zhì)來源
重組大腸桿菌菌株攜帶的POLA基因。
提供：
25 mM Tris-HCl
0.1 mM EDTA
1.0 mM DTT
50% glycerol
pH 7.4 @ 25°C
隨附：
pB0110 (10X Blue Buffer)
10X Blue Buffer (B0110)：
500 mM NaCl
100 mM Tris-HCl
100 mM MgCl2
10 mM DTT
pH 7.9 @ 25°C
單位定義
1單位定義為在37℃30分鐘內(nèi)將10nmol dNTPs轉(zhuǎn)化為酸不溶性物質(zhì)所需的聚合酶量。
質(zhì)量控制分析
單位表征測定
單位活性使用2倍系列稀釋法測量。在1X Blue反應緩沖液中制備酶的稀釋液，并加入含有小牛胸腺DNA，1X藍色反應緩沖液，3H-dTTP和100μMdNTP的50μL反應物中。將反應在37℃孵育10分鐘，在冰上沉降，并使用TCA沉淀法分析。
蛋白質(zhì)濃度（OD 280）測量使用使用2.0mg / ml BSA樣品（Pierce Cat＃23209）標準化的Nanodrop ND-1000分光光度計
在OD 280處分析2.0μL酶樣品并用產(chǎn)品儲存溶液沖切。使用80,790的消光系數(shù)和103,118道爾頓的分子量將觀察到的3個重復樣品的平均測量值轉(zhuǎn)換成mg / mL。
SDS-Page（物理純度評估）
將2.0μL濃縮的酶溶液加載到變性的4-20％Tris-甘氨酸SDS-PAGE凝膠上，該凝膠側(cè)翼為寬范圍的MW標記和2.0μL的樣品的1:100稀釋物。電泳后，將凝膠染色并比較??樣品以確定物理純度。該測試的驗收標準要求濃縮樣品中污染帶的總量不超過稀釋樣品中目的蛋白質(zhì)條帶的質(zhì)量，確認濃縮樣品的純度大于99％。
污染測試
單鏈核酸外切酶活性
將含有10,000cpm放射性標記的單鏈DNA底物和10μL酶溶液的50μL反應物在37℃下孵育4小時，導致TCA可溶性計數(shù)的釋放超過80％。
雙鏈核酸外切酶活性將含有5,000cpm放射性標記的雙鏈DNA底物的50μL反應液和10μL在37℃下孵育4小時的酶溶液導致超過50％的TCA可溶性計數(shù)的釋放。
雙鏈核酸內(nèi)切酶活性將含有0.5μgpBR322 DNA和10μL酶溶液的50μL反應物在37℃下溫育4小時，結果通過瓊脂糖凝膠電泳確定沒有肉眼可察覺地轉(zhuǎn)化為帶切口的環(huán)狀DNA。
大腸桿菌 16S rDNA污染測試
重復5μL酶溶液樣品變性，并在TaqMan qPCR測定中篩選污染性 大腸桿菌 基因組DNA，使用對應于16S rRNA基因座的寡核苷酸引物。測試的驗收標準是由3個重復的無模板對照樣品的平均值產(chǎn)生的閾值循環(huán)計數(shù)（C t）。基于無模板對照 Ct 值與標準曲線數(shù)據(jù)之間的相關性，該測定的檢測限為<10拷貝基因組/樣品。
部分產(chǎn)品信息：
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 濃度 | 品牌 |
|---|---|---|---|---|
N2070-10-L | ATP Solution | 50 µmol | 10 mM | Enzymatics |
N2050-10-L | 10 mM dNTP Solution Mix | 100 µmol | 10 mM | Enzymatics |
N2010L | 100 mM 75µmol dNTP Solution Set | 75 µmol | 100 mM | Enzymatics |
N2010-A-L | 100 mM dATP Solution | 75 µmol | 100 mM | Enzymatics |
N2050L | 100µmol dNTP Solution Mix | 100 µmol | 25 mM | Enzymatics |
Y9180L | 10x Uracil Cleavage System | 750 Reactions | N/A | Enzymatics |
P7670 | 2x HiFi PCR Master Mix | 1 rxn | 2x | Enzymatics |
Y9420L | 5x ER/A-Tailing Enzyme Mix | 24 reactions | N/A | Enzymatics |
Y9380L | E. coli Pyrophosphatase | 50 U | 100 U/mL | Enzymatics |
Y9030L | E. coli Single-Stranded DNA Binding Protein | 1.5 mg | 2.75 mg/ml | Enzymatics |
Y9140-HC-L | End-Repair Mix (High Concentration) | 75 Reactions | 1 Rxn/µL | Enzymatics |
Y9140-LC-L | End-Repair Mix (Low Concentration) | 200 Reactions | 1 Rxn/µL | Enzymatics |
Y9080L | Endonuclease VIII | 10,000 U | 10,000 U/ml | Enzymatics |
P7600L | EnzScript™ (MMLV Reverse Transcriptase RNase H-) | 10,000 U | 200,000 U/mL | Enzymatics |
X8010L | Exonuclease I | 30,000 U | 20,000 U/ml | Enzymatics |
X8020L | Exonuclease III | 50,000 U | 100,000 U/ml | Enzymatics |
P7010-HC-L | Klenow (3′→ 5′ exo-) (High Concentration) | 10,000 U | 50,000 U/ml | Enzymatics |
P7010-LC-L | Klenow (3′→ 5′ exo-) (Low Concentration) | 10,000 U | 5,000 U/ml | Enzymatics |
P7060L | Klenow Fragment | 2,500 U | 5,000 U/ml | Enzymatics |
X8030L | Lambda Exonuclease | 10,000 U | 5,000 U/ml | Enzymatics |
P7040L | M-MuLV Reverse Transcriptase | 100,000 U | 200,000 U/ml | Enzymatics |
P7090L | Mako DNA Polymerase (3′→ 5′ exo-) | 3,000 U | 30,000 U/ml | Enzymatics |
P7140-HC-L | Manta 1.0 DNA Polymerase (High Concentration) | 100,000 U | 400,000 U/ml | Enzymatics |
P7140-LC-L | Manta 1.0 DNA Polymerase (Low Concentration) | 100,000 U | 40,000 U/ml | Enzymatics |
P7610L | NGS Library Prep: 2X VeraSeq™ PCR Mix – 250 Reactions | 250 Reactions | 2X | Enzymatics |
P7590L | Phoenix™ Hot Start Taq DNA Polymerase | 500 U | 5,000 U/ml | Enzymatics |
P7460L | Poly(A) Polymerase | 1,000 U | 5,000 U/mL | Enzymatics |
Y9260L | RecA | 1.5 mg | 2.0 mg/mL | Enzymatics |
Y9220L | RNAse H | 5,000 U | 5,000 U/ml | Enzymatics |
Y9240L | RNAse Inhibitor | 20,000 U | 40,000 U/ml | Enzymatics |
L6010L | T3 DNA Ligase | 900,000 U | 3,000,000 U/ml | Enzymatics |
L6030-LC-L | T4 DNA Ligase | 150,000 U | 120,000 U/ml | Enzymatics |
L6030-HC-L | T4 DNA Ligase (Rapid) | 240,000 U | 600,000 U/ml | Enzymatics |
P7080L | T4 DNA Polymerase | 2,000 U | 3,000 U/ml | Enzymatics |
Y9130L | T4 Gene 32 Protein | 1.0 mg | 10 mg/mL | Enzymatics |
Y9040L | T4 Polynucleotide Kinase | 10,000 U | 10,000 U/ml | Enzymatics |
L6050L | T4 RNA Ligase 1 | 10,000 U | 20,000 U/ml | Enzymatics |
L6080L | T4 RNA Ligase 2 | 4,500 U | 30,000 U/ml | Enzymatics |
L6070L | T4 RNA Ligase 2 Truncated | 500 U | 5,000 U/ml | Enzymatics |
L6020L | T7 DNA Ligase | 900,000 U | 3,000,000 U/ml | Enzymatics |
P7260L | T7 DNA Polymerase | 3,500 U | 10,000 U/ml | Enzymatics |
P7180L | T7 RNA Polymerase | 50,000 U | 50,000 U/ml | Enzymatics |
L6060L | Taq DNA Ligase | 20,000 U | 40,000 U/ml | Enzymatics |
P7110L | Taq DSC 2.0 DNA Polymerase | 1,250 U | 5,000 U/ml | Enzymatics |
P7250L | Taq-B DNA Polymerase | 10,000 U | 5,000 U/ml | Enzymatics |
P7620L | TaqIT | 5,000 U | 50,000 U/mL | Enzymatics |
P7070L | Terminal deoxynucleotidyl Transferase (TdT) | 6,000 U | 20,000 U/ml | Enzymatics |
G5020L | Thermolabile UDG | 500 U | 1,000 U/ml | Enzymatics |
Y9370L | Thermostable Pyrophosphatase | 1,250 U | 2,000 U/ml | Enzymatics |
G5010L | Uracil DNA Glycosylase | 10,000 U | 2,000 U/ml | Enzymatics |
P7511L | VeraSeq™ 2.0 High-Fidelity DNA Polymerase | 500 U | 2,000 U/ml | Enzymatics |
P7520L | VeraSeq™ ULtra DNA Polymerase | 500 U | 2,000 U/ml | Enzymatics |
L6030-W-L | WGS Ligase | 24 Reactions | N/A | Enzymatics |
P7640L | ZipScript™ One-Step RT-qPCR Kit | 1000 Reactions | N/A | Enzymatics |
P7020-HC-L | φ29 DNA Polymerase (High Concentration) | 2,000 U | 100,000 U/ml | Enzymatics |
P7020-LC-L | φ29 DNA Polymerase (Low Concentration) | 2,000 U | 10,000 U/ml | Enzymatics |
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